1、常規方法將細胞消化成單細胞懸液；

2、轉入試管，1000轉/分鐘離心5分鐘；

3、配適量凍存液（為含10%二甲亞砜（DMSO），10%FBS的DMEM培養液）；

4、棄上清，每管加入1ml凍存液，吹打成細胞懸液（只要使ES細胞分散成3—5個細胞的小團塊即可），轉入凍存管，作好標簽；5.放入程序凍存盒內24小時后轉入液氮罐中凍存。



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